经过我们多年生产实践栽培总结出（chū）来的（de）经验是选用当年（nián）表现优异的羊（yáng）肚菌子实（shí）体进行组织分离以后，再繁育出（chū）来的（de）菌（jun1）种进行栽培播种，由于转代次数少，变异性概率（lǜ）低。再进行播种，基（jī）本（běn）可以保障稳定（dìng）的出（chū）菇率。综上所（suǒ）述，掌握（wò）成熟的羊肚菌育种技术是必（bì）要的。以下（xià）为大家详细的介绍羊肚菌菌种分离及提（tí）纯复（fù）壮技术：
一，选种菇  正常情况在清晨还没有浇水之前采摘6分熟的，没有（yǒu）病（bìng）害感染，虫害咬（yǎo）食（shí）的健康羊肚菌作（zuò）为（wéi）种菇，还要（yào）看菇形（xíng）与其母本的外（wài）观形态相似度越高越（yuè）好（hǎo）。采菇以后不要带土装入塑料（liào）袋中，根（gēn）据不同品种写（xiě）好标签。
二，种菇处理  将采（cǎi）到的种菇进行测量，称重，并做（zuò）好详细记（jì）录，测试种菇高，菌柄直径，菌帽直径，和菌帽高度。

三（sān），准备工作  将制备（bèi）好的PDA 培（péi）养基试管，无菌水，储水罐，酒精棉，无菌（jun1）棉摄子，酒精灯，火机，种菇（gū）等物品放（fàng）到（dào）无（wú）菌（jun1）操作台上，将杀菌灯开好（hǎo），无菌风机同时打开，20分钟后就可以进行分离（lí）羊（yáng）肚菌菌（jun1）种（zhǒng）的操作了（le）。也可以（yǐ）在（zài）接（jiē）种箱中进行，把上（shàng）述物（wù）品全部放入接种箱。接种箱封闭（bì）好以后用二氯（lǜ）异（yì）氰悄酸纳薰蒸30分钟即可开（kāi）始分离（lí）羊肚菌菌种的工作了。

四（sì），分离菌种（zhǒng）  1，带好手套，伸（shēn）入无菌操作台的无菌区，或接种（zhǒng）箱内（nèi），先（xiān）用酒精（jīng）棉球（qiú）对（duì）双手手套外表进行彻（chè）底擦拭消毒，然（rán）后用无（wú）菌（jun1）水对羊肚（dù）菌种菇进行（háng）冲洗冲洗过程的水（shuǐ）倒入储水罐中，内外都要冲（chōng）洗，冲洗时间为2-3分钟（zhōng），冲洗以后用无菌棉吸（xī）干羊肚菌表面水分。然后（hòu）将（jiāng）攝子用酒精棉（mián）消毒处理以后，放在酒精灯（dēng）火焰顺风方向燃烧消毒，再将羊肚菌菌帽（mào）与菌柄处掰断，将菇帽部分（fèn）放到（dào）一边，只（zhī）用菌（jun1）柄部（bù）分（fèn），再拿（ná）起一（yī）支试管（试管和菌柄同（tóng）时（shí）用左手拿好，在酒精灯（dēng）火焰顺风处取（qǔ）下棉（mián）塞，棉塞夹在右手中指和无名指之间，注（zhù）意塞入试管部分的棉塞向（xiàng）外，不要与（yǔ）手接触，右手的拇指和食指拿摄子夹取菌（jun1）柄（bǐng）与菌帽断（duàn）开（kāi）处（chù）的3毫米见方的一块（kuài）羊肚（dù）菌组织，接入试管斜（xié）面培养基前端，塞好棉塞，放在旁边，注意始终保（bǎo）持试管培养基平面向下（xià），轻拿（ná）轻放。然后（hòu）再进行（háng）下一支（zhī）试管的操（cāo）作。

五（wǔ），培养  将分离好的（de）菌种贴好标签：标（biāo）签（qiān）内容（róng）包括日期，品种（zhǒng）名称等信（xìn）息。然后就可以放在20-23度的条件下恒（héng）温（wēn）培养。注意每天观察（chá）长（zhǎng）势，杂（zá）菌感染严重的及（jí）时挑出。感染轻微的可以保留进（jìn）行提纯（chún）处理。

六（liù），提纯  在分离（lí）的（de）过程中，难免有杂菌感染，根据羊肚菌（jun1）菌（jun1）丝生长（zhǎng）速度快（kuài）的特点，即使有羊肚菌菌丝与杂菌共同萌（méng）发生长，经（jīng）过三天培养，羊肚菌菌丝长势会超过杂菌一大截，遇到这种（zhǒng）情况时就（jiù）可以进行提纯处理（lǐ）：
1，准（zhǔn）备工作（zuò）：准备提（tí）纯的菌种，空PDA试（shì）管培养基，酒精灯，酒（jiǔ）精（jīng）棉，接种钩，火机。消毒处理和（hé）上述方法一致。
2，提纯流程  戴好手（shǒu）套（tào），用（yòng）酒精（jīng）棉（mián）擦拭消毒，将接种（zhǒng）钩擦拭消毒，然后在酒精灯（dēng）火焰顺风方向取下等待提纯菌种（zhǒng）试管棉塞，用接（jiē）种钩在酒（jiǔ）精灯火（huǒ）焰处（chù）灼烧消毒处理以（yǐ）后将原来接入的已经感染杂菌（jun1）的组织块部位（wèi）的培养基一同钩（gōu）出试管，没（méi）有感染杂菌长有羊肚菌菌（jun1）丝的（de）培养基（jī）保留1-2厘米（mǐ）即可。注意接种钩尽量不要接触（chù）到杂菌感染的部分。然后（hòu）仔细对（duì）接种钩进行彻底消毒处理以（yǐ）后就可以取保留的羊（yáng）肚菌纯（chún）菌（jun1）丝接入新的（de）PDA培养基中，大（dà）小以3毫米见方一块（kuài）为宜。然（rán）后（hòu）将（jiāng）提纯后的试管贴好标签，做好记录（lù）。再放到20-23度进行恒温培养。
七，菌（jun1）种保藏   分离，提纯好的（de）羊肚菌菌种（zhǒng）以后需要及时进行菌种（zhǒng）保（bǎo）藏处（chù）理，具体请参照菌种保藏方法 在适（shì）当的季（jì）节（jiē）进行出（chū）菇栽培（péi）实验。